Araştırma Makalesi Research Article	Anti Nükleer Antikor (ANA) ve Ekstrakte Edilebilir Nükleer Antijen Antikor (anti-ENA) İmmünoblot Test Sonuçlarının Beş Yıllık Analizi Five-Year Analysis of Anti-Nuclear Antibody (ANA) and Extractable Nuclear Antigen Antibody (anti-ENA) Immunoblot Test Results *İsmail Selçuk AYGAR^1[ID], İlhan CEBECİ^2[ID] Özet Otoimmün bozukluklar birden fazla organın etkilendiği sistemik hastalık tablolarına neden olabilecekleri gibi tek organa özgü tutulum şeklinde de seyredebilirler. Sistemik tutulum görülen ve ayırıcı tanının zorlaştığı veya non-spesifik semptomların görüldüğü durumlarda tanıya yardımcı çeşitli immünolojik testler kullanılır. Bu amaçla hasta serumlarında çeşitli yöntemlerle antinükleer antikorların (ANA) ve ekstrakte edilebilir nükleer antijenlere (ENA) karşı oluşan antikorların araştırılması klinisyenler için yol göstericidir. Bu çalışmada testlerin sonuçlarını, hastaların demografik verilerini ve test istemi yapan klinikleri inceleyerek ANA ve ENA antikor testlerinin etkinliğini değerlendirmeyi amaçladık. Çalışmada Ocak 2018-Aralık 2022 tarihleri arasında çeşitli kliniklerden hastanemiz tıbbi mikrobiyoloji laboratuvarına gönderilen serum örneklerinde çalışılan 37.791 ANA testine ait sonuçların retrospektif bir incelemesi sunulmuştur. ANA testleri, serum örneklerinin 1:100 oranında dilüe edilmesi sonrasında HEp-2 hücreleri ve maymun karaciğer dokusu kullanılarak hazırlanan slaytların indirekt immünfloresan (IIF) antikor metodu ile floresan mikroskop altında incelenmesi ile yarı kantitatif olarak sonuçlandırıldı. ANA test istemi yapılan hastaların 11.604’ü (%30.7) erkek, 26.187’si (%69.3) kadındı. Yaş ortalamaları sırasıyla 43.46 (0-94) ve 46.94 (0-96) olarak tespit edildi. Test edilen numunelerin %18.8’i (7.107/37.791) ANA pozitif olarak değerlendirildi. ANA pozitiflik oranı kadınlarda (%24.8) erkeklere (%19.7) göre anlamlı derece daha yüksekti (p<0.001). ANA pozitifliği saptanan numuneler anti-ENA immünoblot yöntemi ile tekrar çalışıldı. ANA pozitif 7.107 hastanın 3.809’unda (%53.6) en az bir spesifik antikor için anti-ENA pozitifliği saptanırken, 3.298’i (%46.4) negatif idi. Anti-ENA profilinde 11 farklı antijen tipine karşı oluşan antikorlar tarandı ve en sık saptanan antikor anti-SS-A (%22.7) olarak bulundu, bunu anti-sentromer (%12.8), anti-RNP (%10.2) ve anti-dsDNA (%9.7) antikorları takip ediyordu. İmmünoblot temelli anti-ENA testleri otoimmün hastalıkların tanısı için spesifik bilgiler sunmaktadır. Çalışmamızda ANA pozitif hastaların önemli bir bölümünde anti-ENA testlerinin negatif olması, immünoblot test panelinin yetersizliğine işaret etmekte ve antikor çeşitliliği daha geniş immunoblot testlerine veya alternatif yöntemlere olan gereksinimi ortaya koymaktadır. Anahtar kelimeler: ANA, ENA, İmmünoblot, Otoimmün hastalık. Abstract Autoimmune disorders may cause systemic disease in which multiple organs are affected or may also be localized as single-organ involvement. Various ancillary immunological tests used in cases where systemic involvement is observed, and differential diagnosis becomes difficult or non-specific symptoms are observed. For this purpose, investigation of antinuclear antibodies (ANA) and antibodies against extractable nuclear antigens (ENA) in patient serums using various methods is a guide for clinicians. In this study, we aimed to evaluate the effectiveness of ANA and ENA antibody tests by examining the test results, the patients’ demographic data, and the clinics that ordered the tests. In the study, a retrospective review of the results of 37,791 ANA tests studied on serum samples sent to the medical microbiology laboratory of our hospital from various clinics between January 2018 and December 2022 is presented. ANA tests were resulted semi-quantitatively by evaluating the slides prepared using diluted serum samples at a ratio of 1:100 and HEp-2 cells and monkey liver tissue under a fluorescent microscope with the indirect immunofluorescence (IIF) antibody method. Of the patients who requested ANA test, 11,604 (30.7%) were male and 26,187 (69.3%) were female. The mean ages were 43.46 (0-94) and 46.94 (0-96), respectively. Of the samples tested, 18.8% (7,107/37,791) were evaluated as ANA positive. The ANA positivity rate was significantly higher in women (24.8%) than in men (19.7%) (p<0.001). ANA positive samples were re-tested using the anti-ENA immunoblot method. Of the 7,107 ANA-positive patients, 3,809 (53.6%) were found to be anti-ENA positive for at least one specific antibody, while 3,298 (46.4%) were negative. In the anti-ENA profile, antibodies against 11 different antigen types were screened and the most frequently detected antibody was anti-SS-A (22.7%), and this was followed by anti-centromere (12.8%), anti-RNP (10.2%), and anti-dsDNA (9.7%) antibodies. Immunoblot-based anti-ENA tests provide specific information for the diagnosis of autoimmune diseases. In our study, the fact that anti-ENA tests were negative in a significant part of ANA positive patients indicates the inadequacy of the immunoblot test panel and reveals the need for immunoblot tests with wider antibody diversity or any alternative methods. Keywords: ANA, ENA, Immunoblot, Autoimmune disease. Şekil 1. ANA test istemiyle gelen numunelerin kliniklere göre sayısal dağılımı ve pozitiflik oranları. Şekil 1 png Figure 1. Distribution and positivity rates of samples submitted with ANA test request according to clinics. Figure 1 png
DOI: 10.54584/lms.2023.40
Article in Turkish
^1Medical Microbiology Laboratory, Gulhane Training and Research Hospital, University of Health Sciences, Ankara, Türkiye. ^2Department of Internal Medicine, Gulhane Training and Research Hospital, University of Health Sciences, Ankara, Türkiye.
*Corresponding author İsmail Selçuk Aygar; MD., Department of Medical Microbiology (Laboratory), Gulhane Training and Research Hospital, University of Health Sciences, Ankara, Türkiye. E-mail: drisa1986@hotmail.com
Received: 21.08.2023 Accepted: 29.09.2023 Published: 02.10.2023
Cite as: Aygar İS, Cebeci İ. Five-Year Analysis of Anti-Nuclear Antibody (ANA) and Extractable Nuclear Antigen Antibody (anti-ENA) Immunoblot Test Results. Life Med Sci 2023; 2(4): 143-149.
View in academic indexes and databases
Cited by 0 article*, 0 book chapter.
©Copyright LMS. Licensed by Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0).